hyclone胎牛血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但少量這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質(zhì)量。若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g 稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞您的過濾膜。
hyclone胎牛血清注意事項:
1.血清解凍與存放:-20℃取出后建議放入2~8℃冰箱中解凍約,每隔一段時間輕輕搖晃均勻,不可直接放入溫度較高處解凍,避免因溫度改變太大,造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀,血清的質(zhì)量下降。若短期無法用完一瓶,建議無菌分裝,再放回冷凍,避免反復(fù)凍融。4℃長時間保存后血清中的變性脂蛋白及纖維蛋白,形成絮狀物質(zhì)變差。
2.血清是否滅活:加熱可滅活血清中補體系統(tǒng),在少數(shù)情況下(培養(yǎng)ES細胞,平滑肌細胞時)建議滅活,在培養(yǎng)其余細胞時不建議滅活血清。血清滅活非常容易產(chǎn)生沉淀,如必須滅活請按56℃,30min,輕微搖晃原則操作,滅活溫度高、時間長、搖晃不均都容易產(chǎn)生沉淀。
3.無血清培養(yǎng)基:無血清培養(yǎng)基在結(jié)果重復(fù)性、細胞體外分化方面有優(yōu)勢,但是,血清仍然是培養(yǎng)液中基本的添加物,尤其是在原代培養(yǎng)或細胞生長狀態(tài)不良時,常常會先使用有血清的培養(yǎng)液進行培養(yǎng),待細胞生長旺盛后再換成無血清培養(yǎng)液。