血清是一種培養(yǎng)基，含有細(xì)胞生長繁殖所需的多種營養(yǎng)成分，如蛋白質(zhì)、多肽等，多用于細(xì)胞培養(yǎng)、生物制品及診斷試劑的生產(chǎn)。 血清的主要成分是蛋白質(zhì)，血清的組成成分與含量常常與供血動物性別、年齡、生理?xiàng)l件和營養(yǎng)條件有關(guān)。
那么如何挑選合適的血清？使用血清時，需要注意哪些問題？現(xiàn)在我們一起來看看。
1.胎牛血清和新生牛血清的區(qū)別是什么？
取血年齡不同：牛血清按照牛取血時間或牛齡可進(jìn)行區(qū)分。胎牛血清（FoetalBovineSerum，簡稱FBS）指的是取自未出生，母牛剖腹得來的胎牛。
國產(chǎn)胎牛血清（并無明確定義，但通常以此稱）的指的是出生4-6小時，且未進(jìn)行哺乳（unsuckled）進(jìn)食的牛，有時還稱作國產(chǎn)新生牛。
新生牛血清（NewbornCalfSerum，簡稱NBCS）指的是出生14天-3個月進(jìn)行取血的牛。
成年牛血清（AdultBovineSerum，簡稱ABS）指的是取血時牛齡通常超過12個月的牛。
以上取血牛齡的差異主要是受當(dāng)?shù)貒倚竽翗I(yè)的發(fā)展及法規(guī)限制影響，因?yàn)榕Ｑ酁樾竽翗I(yè)副產(chǎn)業(yè)，并未有專門為取血而養(yǎng)的牛。
組分與比例不同：這幾種不同牛齡血清所含的促細(xì)胞生長因子、促貼附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組分與比例不同。常規(guī)來說，年齡越小的牛血清，細(xì)胞培養(yǎng)效果越好。胎牛血清培養(yǎng)效果好于新生牛，且因?yàn)樘ヅＮ催M(jìn)食過母乳，所以IgG含量低。
用途與用法不同：根據(jù)細(xì)胞所需生長條件可確定。
2.如何挑選適合細(xì)胞生長的血清？
原代或是正常細(xì)胞株建議使用BI特級胎牛血清，對生長條件要求高的細(xì)胞和干細(xì)胞可選用專用特級胎牛血清，或胚胎干細(xì)胞專用金牌胎牛血清。
由于血清有批間差異，細(xì)胞種類不同，我們建議客戶購買前可先申請?jiān)囉脴悠?，通過篩選得到滿意的血清批號，之后根據(jù)項(xiàng)目需求可進(jìn)行批量囤貨，以保證該項(xiàng)目所需血清質(zhì)量的一致性，可排除不同批號血清對于實(shí)驗(yàn)帶來的影響。
3.如何正確保存血清？
需要長期保存的血清必須儲存于-20℃冰箱（未開封血清有效期為5年）。若存放于4℃，請勿超過1個月，若一次無法用完一瓶，建議將血清無菌分裝并冷凍。
4.如何解凍血清？
血清解凍需采用逐步解凍法：將血清從-20℃冰箱放入4℃冰箱中溶解一天，然后移入室溫，待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻（小心勿造成氣泡），減少沉淀生成。切勿直接將血清從-20℃轉(zhuǎn)入37℃解凍，這樣因溫差較大易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)并出現(xiàn)沉淀。
5.需要對新買的血清進(jìn)行過濾嗎？
血清在ISO13485認(rèn)證的廠房中生產(chǎn)，經(jīng)過3次0.1μm過濾，出廠經(jīng)過檢測并且會使用三種以上的細(xì)胞株進(jìn)行培養(yǎng)測試及無菌檢測，污染幾率非常低。通常細(xì)胞污染有非常多的可能性，根據(jù)協(xié)助使用者進(jìn)行分析檢測，結(jié)果表明絕大部分都是因人為操作失誤導(dǎo)致污染。因此買來的血清不需要再次進(jìn)行過濾。
6.除了對血清進(jìn)行檢測，有何更直觀的方式分辨血清質(zhì)量？
目測法，我們可根據(jù)血清的顏色，沉淀，澄清度等進(jìn)行區(qū)分。
顏色：顏色根據(jù)血清蛋白含量的不同，可表現(xiàn)出黃色或者紅色。進(jìn)口血清質(zhì)量的呈現(xiàn)出淡黃、微紅色，較差質(zhì)量呈現(xiàn)出橘紅色或鮮紅色。熱滅活血清或保存不當(dāng)?shù)?，由于血紅蛋白的破壞氧化，會呈現(xiàn)出暗紅色，甚至咖啡色。
沉淀：血清中的沉淀主要是有纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生。沉淀產(chǎn)生的原因很多，使用時反復(fù)凍融會增加沉淀。進(jìn)口血清過濾分裝前很少反復(fù)凍融，因此成品清澈。
澄清度：進(jìn)口血清是由于蛋白和脂類等物質(zhì)含量低，表現(xiàn)為稀薄、清淡。國產(chǎn)血清絕大多數(shù)為新生牛血清，相對而言更加粘稠，顏色略深。
7.為何血清會存在批間差？如何避免此影響？
因?yàn)檠鍋碓从趧游铮浣M成成分有1000種左右，每個批號的組分和組分含量都是不固定的，因此批間差異是可能存在的。
為了避免批間差異對細(xì)胞的影響，XP建議先進(jìn)行批號測試，篩選合適的批號，備好庫存（血清未開封時，在-20℃下可保存5年）。如需更換血清批次或產(chǎn)地，建議先試用后再大量訂購。
8.血清中沉淀是什么成分？造成原因有哪些？如何預(yù)防和處理沉淀？
血清中沉淀主要有：纖維蛋白（絮狀沉淀），甲胎蛋白，脂蛋白，冷凝集素，玻粘連蛋白，磷酸鈣[1]（顯微鏡下小黑點(diǎn)沉淀），膽固醇等。
原因：造成沉淀的主要原因是溫度的改變。熱滅活，反復(fù)凍融，長期儲存于2-8℃或者室溫。
預(yù)防措施與建議：因此不立即使用的血清應(yīng)保存在-20℃或以下。
9.血清為何要熱滅活，有必要對所有血清都滅活嗎？如何正確的進(jìn)行滅活？
加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。啟動的補(bǔ)體系統(tǒng)參與溶解細(xì)胞事件，刺激平滑肌收縮，細(xì)胞和血小板釋放組胺，啟動淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞活化。在免疫學(xué)研究中，培養(yǎng)ES細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時，推薦使用熱滅活血清。
實(shí)驗(yàn)顯示，熱滅活血清對大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的，對于非必須的細(xì)胞來說血清滅活對于細(xì)胞生長只有微小甚至無任何作用，還可能造成生長速率降低，沉淀物還會顯著增多，不利于細(xì)胞觀察。因此，若非必須，不需要對血清進(jìn)行滅活處理。
將需要進(jìn)行處理的血清置于56℃水浴30min，建議加放空白對照（同體積水）使用溫度計(jì)測溫，以測得溫度為56℃時為計(jì)時起始點(diǎn)，加熱中可不時輕度旋轉(zhuǎn)混勻血清。
